本發明揭露一種水禽小病毒之DNA疫苗，包含具有如序列辨識編號1所示序列之第一聚核苷酸的重組質體，且此重組質體係未經包覆，以促進至少一受免疫動物同時對抗至少一水禽小病毒。其次，本發明更揭露一種水禽小病毒之DNA疫苗，其係由上述重組質體以及如序列辨識編號2所示序列之DNA佐劑所組成，且此重組質體以及DNA佐劑係未經包覆，以促進至少一受免疫動物同時對抗多種水禽小病毒。本發明之目的係利用一種水禽小病毒之DNA疫苗組成物，避免引起水禽類的病毒性腸炎及死亡。